生物

Chicken的第一张Western Blot

材料：GST-tag，猪肝提取液，GSTtag表达菌株裂解液，鼠抗GST-tag抗体，辣根二抗

第一天：GST-tag亲和层析，SDS-PAGE

第二天：转膜，丽春红染色，孵育一抗

第三天：洗脱，孵育二抗，显色

亲和层析流程：猪肝提取液上柱，GST-tag洗脱。细菌裂解液上柱，PBS洗脱

结果解析：右侧三个泳道为Chicken的实验。Input组为细菌裂解液，上部条带为细菌表达的GST-tag，下部条带推测是GST-tag裂解片段，仍具有抗原性。Bacteria组为PBS洗脱产物，可看到少量GST-tag（毕竟洗脱液中无竞争成分）。Liver组为GST-tag洗脱组，理论上含有内源GST，但其无法被抗体识别，故不显色，该组条带为洗脱液中的GST-tag